T cell independent B cell interactions mediated by CD169+ macrophages and neutrophils
(2025) MOBN02 20242Degree Projects in Molecular Biology
- Abstract
- The field of cancer immunology is complex and diverse. In the case of breast cancer, recent advances indicate a prognostic relevance of the lymph node resident subcapsular sinus macrophage (CD169+ macrophages). Depending on the location of its presence, it is correlated with either an improved or worsened prognosis. Remarkably, these CD169+ macrophages display the function of aiding B cell activations. Additionally, neutrophils have recently been proposed to exhibit B cell helper functions, with the ability to induce tumorreactive antibodies in a T cell independent manner. To investigate the interactions between B cells and macrophages or neutrophils in a T cell independent setting, in vitro culturing of the respective cells were... (More)
- The field of cancer immunology is complex and diverse. In the case of breast cancer, recent advances indicate a prognostic relevance of the lymph node resident subcapsular sinus macrophage (CD169+ macrophages). Depending on the location of its presence, it is correlated with either an improved or worsened prognosis. Remarkably, these CD169+ macrophages display the function of aiding B cell activations. Additionally, neutrophils have recently been proposed to exhibit B cell helper functions, with the ability to induce tumorreactive antibodies in a T cell independent manner. To investigate the interactions between B cells and macrophages or neutrophils in a T cell independent setting, in vitro culturing of the respective cells were conducted, followed by analysis of the secretome utilizing cytokine array, mass spectrometry, and enzyme linked immunosorbent assays (ELISAs). Gene expression was measured by quantitative reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-qPCR) and cell surface structures as well as cell proliferation were analyzed using fluorescence-activated cell sorting (FACS). B cell activation was assayed using co-cultures followed by analysis of Ig production with ELISAs and proliferation. The results revealed secretion of various factors, including the well-known B cell mediators a proliferation-inducing ligand (APRIL) and B-cell activating factor (BAFF), by both macrophages and neutrophils. Additionally, the macrophage phenotypes studied indicated expression of the cell surface protein OX40. Co-culturing uncovered increased IgG secretion by B cells in cocultures with macrophages, and increased IgM secretion when B cells were co-cultured with neutrophils. The results from this study indicate that human CD169+ macrophages and neutrophils may be able to aid in T cell independent B cell activation. (Less)
- Popular Abstract (Swedish)
- Ryktesspridning och mellanhänder har aldrig varit viktigare
Immunförsvaret är din kropps skydd mot omvärldens patogener – mikroskopiska organismer som kan framkalla sjukdom. Ett virus, en bakterie eller en parasit. Immunförsvaret kan liknas vid en armé där, liksom vid fronten av ett krig, olika befattningar har särkilda arbetsuppgifter. Likaså har de olika immuncellerna särkilda arbetsuppgifter. Neutrofilerna är de patrullerande spanarna som är först på plats om något obehörigt tar sig in i våra kroppar. De signalerar då fara genom att utsöndra cytokiner – proteiner som lockar till sig andra immunceller och ger anvisningar till vad som väntar vid fronten. Makrofagerna, vars namn översätts till ”storätare”, gör precis vad deras namn... (More) - Ryktesspridning och mellanhänder har aldrig varit viktigare
Immunförsvaret är din kropps skydd mot omvärldens patogener – mikroskopiska organismer som kan framkalla sjukdom. Ett virus, en bakterie eller en parasit. Immunförsvaret kan liknas vid en armé där, liksom vid fronten av ett krig, olika befattningar har särkilda arbetsuppgifter. Likaså har de olika immuncellerna särkilda arbetsuppgifter. Neutrofilerna är de patrullerande spanarna som är först på plats om något obehörigt tar sig in i våra kroppar. De signalerar då fara genom att utsöndra cytokiner – proteiner som lockar till sig andra immunceller och ger anvisningar till vad som väntar vid fronten. Makrofagerna, vars namn översätts till ”storätare”, gör precis vad deras namn avslöjar – de äter, och det mycket. Men istället för att gå efter slagorden ”du blir vad du äter” följer makrofagerna ”du visar vad du äter”. Här kommer B-cellerna in i bilden. B-cellerna är de celler som producerar antikroppar, men de kan inte göra det om de inte får veta vad de ska producera antikroppar mot. Makrofagerna kan berätta det genom att presentera partiklar av det främmande de ätit, samt utsöndra än mer cytokiner. Nu när B-cellerna har fått instruktioner kan de successivt börja svida om till sina militärkläder, eller differentiera, till antikroppsproducerande plasmaceller. Emellertid finns det en kamrat till som B-cellerna oftast behöver för att få fullständiga instruktioner, och kunna utföra sina arbetsuppgifter korrekt – T-cellerna. Men i en situation där T-cellerna inte finns, är instruktionerna från makrofagerna och neutrofilerna tillräckliga för att B-cellerna ska kunna utföra sina uppgifter, och oskadliggöra inkräktaren i vår kropp? Och vad gäller om det inte är en patogen som kommer utifrån, utan en cancercell som bildats inuti oss, och därmed ser väldigt mycket ut som våra egna celler?
I bröstcancer har det upptäckts att en viss typ av makrofager, så kallade CD169+ makrofager, har en prognostisk relevans. Om de återfinns kring metastaser i lymfnoder är prognosen för överlevnad bättre, men om de återfinns vid primärtumören, det vill säga tumören i bröstet, är detta korrelerat med en sämre prognos. Det har också visat sig att dessa makrofager i vissa fall kan hjälpa B-celler, och i andra fall stjälpa för B-celler. I mjälten, som är ett viktigt organ för immunologiska reaktioner, har neutrofiler visat sig kunna hjälpa B-celler att specialisera sina antikroppar. I äggstocksepitelkarcinom har det påvisats att B-celler kan skapa tumörreaktiva antikroppar, utan hjälp av T-celler. Men frågan kvarstår på vilka sätt dessa interaktioner sker. Vilka cytokiner eller vilka strukturer som finns på cellmembranen är viktiga för interaktionerna? På vilket sätt sker ryktesspridningen utan den direkta källan, T-cellerna, via mellanhänderna som är makrofager och neutrofiler?
Vi isolerade och differentierade makrofager och neutrofiler från blod, och odlade dem sedan i cellkultur. Genom att analysera cellerna och vad de utsöndrar, observerade vi att båda celltyperna utsöndrar mediatorer som är viktiga för B-cellers överlevnad, tillväxt och differentiering, såsom BAFF och APRIL. Vi såg också att makrofagerna uttrycker en struktur på sin cellyta som kallas OX40, som upprätthåller B-cellernas överlevnad och specialiserar dess antikroppar om den binder till B-cellens struktur OX40-L. När makrofagerna eller neutrofilerna odlades i kultur tillsammans med B-cellerna, ökade utsöndringen av två typer av antikroppar – immunoglobulin G respektive immunoglobulin M. Resultaten indikerar att makrofager och neutrofiler sannolikt kan ge tillräckligt med instruktioner till B-cellerna.
Masterexamensprojekt i Molekylärbiologi 45 hp 2025
Biologiska Institutionen, Lunds Universitet
Handledare: Karin Leandersson
Cancerimmunologi, Instutionen för Translationell Medicin, Medicinska Fakulteten, Lunds Universitet (Less)
Please use this url to cite or link to this publication:
http://lup.lub.lu.se/student-papers/record/9214702
- author
- Olsson, Elin
- supervisor
- organization
- course
- MOBN02 20242
- year
- 2025
- type
- H2 - Master's Degree (Two Years)
- subject
- language
- English
- id
- 9214702
- date added to LUP
- 2025-10-30 14:44:44
- date last changed
- 2025-10-30 14:44:44
@misc{9214702,
abstract = {{The field of cancer immunology is complex and diverse. In the case of breast cancer, recent advances indicate a prognostic relevance of the lymph node resident subcapsular sinus macrophage (CD169+ macrophages). Depending on the location of its presence, it is correlated with either an improved or worsened prognosis. Remarkably, these CD169+ macrophages display the function of aiding B cell activations. Additionally, neutrophils have recently been proposed to exhibit B cell helper functions, with the ability to induce tumorreactive antibodies in a T cell independent manner. To investigate the interactions between B cells and macrophages or neutrophils in a T cell independent setting, in vitro culturing of the respective cells were conducted, followed by analysis of the secretome utilizing cytokine array, mass spectrometry, and enzyme linked immunosorbent assays (ELISAs). Gene expression was measured by quantitative reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-qPCR) and cell surface structures as well as cell proliferation were analyzed using fluorescence-activated cell sorting (FACS). B cell activation was assayed using co-cultures followed by analysis of Ig production with ELISAs and proliferation. The results revealed secretion of various factors, including the well-known B cell mediators a proliferation-inducing ligand (APRIL) and B-cell activating factor (BAFF), by both macrophages and neutrophils. Additionally, the macrophage phenotypes studied indicated expression of the cell surface protein OX40. Co-culturing uncovered increased IgG secretion by B cells in cocultures with macrophages, and increased IgM secretion when B cells were co-cultured with neutrophils. The results from this study indicate that human CD169+ macrophages and neutrophils may be able to aid in T cell independent B cell activation.}},
author = {{Olsson, Elin}},
language = {{eng}},
note = {{Student Paper}},
title = {{T cell independent B cell interactions mediated by CD169+ macrophages and neutrophils}},
year = {{2025}},
}