Development and Application of Enzyme- and Antibody-based Assays with Emphasis on Selectivity, Sensitivity and Stability

Abstract

This thesis presents the development, optimisation, and various applications of enzyme-based biosensors and immunoassays, mainly with relevance to environmental analysis. the thesis discusses problems and possible solutions associated with selectivity, sensitivity and robustness of such bioassays with emphasis on various immunoasssay configurations for determination of surfactants, phenols, or drugs, and amperometric biosensors based on enzymes (e.g., tyrosinase, cellobiose dehydrogenase, and glucose dehydrogenase), applied for the determination of phenols from environmental samples, or as selective detectors in flow immunoassay.

Abstract (Swedish)

Popular Abstract in Swedish

Utveckling och tillämpning av enzym- och antikroppsbaserade analysmetoder med tyngpunkt på selektivitet, sensitivitet och stabilitet



Molekylär igenkänning är fundamental för funktioner ho's biologiska system. Biologisk aktiva substanser med specifik igenkänning för en målmolekyl tillämpa's mer och mer inom olika användningsområden, där de efterliknar dera's naturliga funktion i t.ex. bioassay's. I princip är selektiviteten och känsligheten för en specifik molekylär igenkänning grunden för analysmetoder som bygger på biologiska molekyler för bestämning av en analyt i fråga. Nuförtiden har bioassay's ett brett användningsområde inom klinisk och pharmaceftisk analy's, men metoderna är fortfande relativt begränsande inom andra områden t.ex. miljöanaly's. I den meningeningen är den höga potentialen att använda bioassay's som en känslig och selektiv analytisk metod har delvi's blivit upphävt på grund av att aktiviteten ho's biologisk aktiva substanser är mycket känslig för miljöfaktorer, vissa kända faktorer (t.ex. inhibitorer, korsreaktiva ämnen), men många okända (t.ex. " matriseffekt"), del's för användaren och del's för det faktum att en relevant miljömässig referencematri's är svår att erhålla. I den är avhandlingne diskutera's problem och möjliga lösningar med avseende på selektivitet, sensitivitet och robusthet för bioassay's med tyngpunkt på olika immunoassay-uppsättningar för bestämning av surfaktanter, fenoler eller läkemedel. Även amperometriska biosensorer med enzymer, tex tyrosina's, cellbiosdehydrogena's och glukosdehydrogena's), använda för bestämning av fenoler från miljöprover eller som selektiva detektorer i flödesimmunoassay har studerat's.

• author: Nistor, Catalin
• supervisor: [unknown] [unknown]
• opponent: Professor Irth, Hubertus, Division of Analytical Chemistry, Vrije University, amsterdam, The Netherlands
• organization: Centre for Analysis and Synthesis
• publishing date: 2002
• type: Thesis
• publication status: published
• subject: Analytical Chemistry
• keywords: stability, sensitivity, selectivity, cross-reactivity, sample matrix effects, environmental pollutants, enzyme biosensor, immunoassay, Analytical chemistry, Analytisk kemi
• pages: 233 pages
• defense location: Center of Chemistry and Chemical Engineering, Lecture Hall B
• defense date: 2002-09-05 10:15:00
• ISBN: 91-7422-006-3
• language: English
• LU publication?: yes
• additional info: Article: I. C. Nistor, J. Emnéus, L. Gorton, and A. Ciucu, "Improved stability and altered selectivity of tyrosinase-based carbon electrodes for detection of phenolic compounds", Anal. Chim. Acta, 1999, 387, 309-326. Article: II. C. Nistor, A. Oubiña, D. Barceló, M.-P. Marco, and J. Emnéus, "Competitive flow immunoassay with fluorescence detection for determination of 4-nitrophenol", Anal. Chim. Acta, 2001, 426, 185-195. Article: III. E. Burestedt, C. Nistor, U. Schagerlöf, and J. Emnéus, "An enzyme-flow immunoassay that uses b-galactosidase as the label and a cellobiose dehydrogenase biosensor as the label detector", Anal. Chem., 2000, 72, 4171-4177. Article: IV. M. Badea, C. Nistor, Y. Goda, S. Fujimoto, S. Dosho, A. Danet, D. Barceló, F. Ventura, and J. Emnéus, "A flow immunoassay for alkylphenol ethoxylate surfactants?highlighting questions associated with cross-reactivity, matrix effects, and validation by chromatographic techniques", 2002, submitted to Anal. Chem. Article: V. C. Nistor and J. Emnéus, "A capillary-based amperometric flow-immunoassay for 2,4,6-trichlorophenol", 2002, submitted to Anal. Bioanal. Chem. Article: VI. M. Fránek, J. Zeravík, S. Eremin, J. Yakovleva, M. Badea, A. Danet, N. Ocio, C. Nistor, and J. Emnéus, "Antibody-based methods for surfactant screening", Fresenius? J. Anal. Chem., 2001, 371, 456-466. Article: VII. C. Nistor, M.-P. Marco, M. Tudorache, and J. Emnéus, "Practical ways to modulate the sensitivity of competitive immunoassays", 2002, submitted to Anal. Biochem. Article: VIII. C. Nistor and J. Emnéus, "An enzyme flow immunoassay using alkaline phosphatase as the label and a tyrosinase biosensor as the label detector", Anal. Commun., 1998, 35, 417-419. Article: IX. C. Nistor, A. Rose, M. Farré, L. Stoica, U. Wollenberger, T. Ruzgas, D. Pfeiffer, D. Barceló, L. Gorton, and J. Emnéus, "In-field monitoring of cleaning efficiency in wastewater treatment plants using two phenol-sensitive biosensors", Anal. Chim. Acta, 2002, 456, 3-17. Article: X. C. Nistor, J. Christensen, N. Ocio, L. Nørgaard, and J. Emnéus, "Multivariate analysis to resolve the signal given by cross-reactants in immunoassay with sample matrix dilution", 2002, submitted to Anal. Chem. Article: XI. C. Nistor, A. Osvik, R. Davidsson, A. Rose, U. Wollenberger, D. Pfeiffer, J. Emnéus and L. Fiksdal, "Detection of Escherichia coli in water by culture-based amperometric and luminometric methods", Water Sci. Technol., 2002, 45, 191-199. Article: XII. M. Castillo, J. Riu, F. Ventura, R. Boleda, R. Scheding, H. Fr. Schröder, C. Nistor, J. Emnéus, P. Eichhorn, Th. P. Knepper, C.C.A. Jonkers, P. de Voogt, E. González-Mazo, V.M. Léon, and D. Barceló, "Inter-laboratory comparison of liquid chromatographic techniques and enzyme-linked immunosorbent assay for the determination of surfactants in wastewaters", J. Chromatogr. A, 2000, 889, 195-209. The information about affiliations in this record was updated in December 2015. The record was previously connected to the following departments: Analytical Chemistry (S/LTH) (011001004)
• id: 5db78894-fea6-400f-bc51-fbea2051b01a (old id 464784)
• date added to LUP: 2016-04-04 11:21:54
• date last changed: 2018-11-21 21:04:22